Custom Protein Science Services
ARVYS Proteins Inc. es una organización de investigación por contrato (OIC) que se especializa en servicios de proteínas personalizados para el descubrimiento de medicamentos y la investigación de ciencias de la vida. Nuestra firme experiencia integrada en la bioquímica de proteínas, experiencia de trabajo con varios sistemas de expresión recombinante y clases de proteínas, conocimiento actualizado en las tecnologías de proteínas, nos permiten convertirnos en un socio fiable e ingenioso para nuestros clientes. Ayudamos en cualquier etapa de un proyecto de proteínas. Nuestro objetivo es convertirnos en su opción de externalización preferida para los servicios de proteínas y trabajaremos mucho para ganarnos su confianza.

Nuestros servicios de proteínas

Protein Expression

Expresión Proteica

Generación de proteínas recombinantes heterólogas en sistemas de expresión múltiple
Fermentation & Cell Culture

Fermentación y Cultivo Celular

Producción de biomasa bacteriana, levadura, insectos y mamíferos para procesos de mayor escala
Protein Purification

Purificación de Proteínas

Los preparados homogéneos y bien caracterizados ahorran tiempo, esfuerzo y recursos
Protein Characterization

Caracterización de Proteínas

Diseño personalizado para abordar objetivos específicos de caracterización de proteínas
Functional Assays and Assay Development

Ensayos Funcionales y Desarrollo del Ensayo

Protocolos con detección por espectroscopia UV-Vis, fluorescencia o luminiscencia
ELISA Development

Desarrollo del Ensayo por Inmunoabsorción Ligado a Enzimas (ELISA)

Desde la selección de los componentes del ensayo hasta el desarrollo de un protocolo de trabajo
Protein Labeling and Conjugation

Etiquetado y Conjugación de Proteínas

Desarrollo de estrategias para maximizar la funcionalidad de las proteínas modificadas
Endotoxin Removal and Testing

Eliminación y Pruebas de Endotoxinas

Servicio de expertos en menos de 1 semana
Antibody Development & Production

Desarrollo y Producción de Anticuerpos

De la generación de antígenos a la caracterización de anticuerpos

ARVYS Proteins Inc. ofrece más

¿Busca servicios adicionales? Ofrecemos incluso más servicios de los enumerados, contáctenos para averiguar cómo podemos ayudarle. Utilizando los últimos avances en las tecnologías relacionadas con las proteínas ARVYS Proteins Inc. se esfuerza por proporcionar los servicios de proteína personalizados de la más alta calidad en la industria. Trabajamos estrechamente con usted, analizamos su proyecto en la etapa de planificación y adoptamos varios enfoques para garantizar que obtenga los resultados que busca.
Servicios

Expresión proteica

Nuestros Servicios de expresión proteica incorporan los últimos desarrollos en las tecnologías de expresión de bacterias, baculovirus y mamíferos para asegurar que su producción de proteínas recombinantes sea eficiente y económica. Ofrecemos una serie de Servicios de expresión proteica diseñados para cumplir los objetivos específicos, que van desde la expresión de proteínas etiquetadas para la investigación hasta la producción de productos biofarmacéuticos para el uso clínico. Su Expresión proteica personalizada se optimizará mediante la ingeniería de una construcción de expresión con un inserto de ADN de codón optimizado, un fuerte promotor, un sitio de unión de ribosomas eficiente, un alto número de copias y combinándolo con un receptor apropiado. El alto nivel de expresión proteica también depende de la estabilidad, solubilidad y vía de plegamiento del producto proteico. En consecuencia, optimizaremos estos parámetros de expresión proteica cuando dicha optimización sea necesaria.

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INGENIERÍA GENÉTICA

  • generación de un gen por reacción en cadena de la polimerasa (RCP) o síntesis
  • subclonaje en el vector apropiado
  • confirmación del inserto de ADN mediante secuenciación de Sanger
  • preparación de plásmidos y almacenamiento de ADN
  • mutagénesis dirigida

EXPRESIÓN PROTEICA BACTERIANA

  • optimización de codones para la expresión bacteriana y síntesis génica del inserto de ADN
  • mutagénesis de un constructo existente
  • generación de constructo(s) de expresión bacteriana en un vector seleccionado o especificado por el cliente
  • transformación en un receptor apropiado y preparación de reservas de glicerol
  • estudios de selección para la variante de proteína que mejor se expresa 
  • optimización de las condiciones de crecimiento (receptor, inducción, medio, temperatura, aditivos) para impulsar la expresión de cuerpos solubles o de inclusión 
  • evaluación de la expresión de cuerpos de inclusión solubles frente a la SDS-PAGE (electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato sódico)/colorante azul de Coomassie o la técnica Western blot
  • producción a escala de pasta bacteriana (leer más Fermentación y cultivo celular)
  • lavado y recuperación de los cuerpos de inclusión
  • purificación de proteínas recombinantes a partir de la fracción soluble del lisado (leer más Purificación de proteínas)
  • purificación de proteínas recombinantes a partir de cuerpos de inclusión por replegado (leer más Purificación de proteínas)

EXPRESIÓN PROTEICA DE INSECTOS INDUCIDA POR BACULOVIRUS

  • optimización de codones para la expresión celular de insectos y síntesis génica del inserto de ADN
  • mutagénesis de un constructo existente
  • subclonaje de un inserto de ADN en un vector de expresión de baculovirus seleccionado o especificado por el cliente 
  • generación, amplificación y clonación de virus mediante dilución limitada o purificación en placa 
  • generación de reservas de virus de título alto
  • SDS-PAGE, Western, ELISA o análisis de expresión funcional de lisados celulares y medios condicionados para productos proteicos intracelulares y secretados respectivamente
  • expresión secretada o intracelular en células de insectos Sf9, Sf21 y HiFive
  • estudios de optimización de expresión: multiplicidad de la infección, curso temporal, medios de crecimiento
  • cultivo celular de insectos a gran escala para medios acondicionados o producción de sedimento celular (leer más Fermentación y cultivo celular)
  • purificación de proteínas recombinantes a partir de medios acondicionados o sedimento celular (leer más Purificación de proteínas)

EXPRESIÓN PROTEICA DE LEVADURA

  • optimización de codones para la expresión celular de levadura y síntesis génica del inserto de ADN
  • subclonaje de un inserto de ADN en un vector de expresión de levadura seleccionado 
  • mutagénesis de un constructo existente
  • generación de transformantes en levadura
  • selección de transformantes de alto rendimiento por Western, ELISA o análisis de expresión funcional de lisados celulares
  • expresión intracelular de proteínas de membrana en células de la levadura S.cerevisiae
  • expresión secretada en células de la levadura Pichia
  • estudios de optimización de expresión: señal de secreción, cepa huésped, medios
  • cultivo celular de levadura a gran escala para medios acondicionados o producción de sedimento celular, purificación de proteínas recombinantes a partir de medios acondicionados o sedimento celular (leer más Fermentación y cultivo celular)
  • purificación de proteínas recombinantes a partir de medios acondicionados o sedimento celular (leer más Purificación de proteínas)

EXPRESIÓN PROTEICA DE MAMÍFEROS

  • optimización de codones para la expresión celular de mamíferos y síntesis génica del inserto de ADN 
  • mutagénesis de un constructo existente
  • generación de constructo(s) de expresión proteica de mamíferos en un vector seleccionado o especificado por el cliente
  • preparado de ADN plasmídico libre de endotoxinas para transfecciones estables o transitorias
  • ensayo a pequeña escala para evaluar la expresión proteica recombinante y/o para optimizar las condiciones de transfección transitoria
  • diversas opciones de reactivo de transfección transitoria
  • generación de grupo celular transfectado de forma estable
  • análisis de expresión por SDS-PAGE, Western, ELISA o ensayo funcional
  • expresión secretada o intracelular en células de ovario de hámster chino (OHC), células embrionarias de riñón humano HEK293, HEK293E o células especificadas por el cliente 
  • opciones de crecimiento de células adherentes o en suspensión
  • cultivo celular de mamíferos a gran escala para medios acondicionados o producción de sedimento celular (leer más Fermentación y cultivo celular)
  • purificación de proteínas recombinantes a partir de medios acondicionados o sedimento celular (leer más Purificación de proteínas)

DESARROLLO ESTABLE DE LÍNEA CELULAR

LOS SERVICIOS AUXILIARES DE EXPRESIÓN PROTEICA INCLUYEN

  • almacenamiento a largo plazo para reservas de ADN, glicerol y virus
  • banco de células maestras y de trabajo

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Servicios

Fermentación y Cultivo Celular

La calidad de los materiales de base resultantes de Fermentación a gran escala a menudo determina la estrategia de purificación o incluso el éxito de la purificación. Nuestros Servicios de cultivo celular tienen como objetivo lograr la máxima producción de r-proteínas a través de la optimización de los procesos de fermentación y podría ser un paso de purificación muy importante por sí mismo. El tiempo y esfuerzo invertidos en esta etapa a menudo dan como resultado protocolos de purificación sustancialmente más cortos y mayores rendimientos de r-proteína activa. Nuestra experiencia con varias líneas celulares de alta producción, modos de crecimiento de cultivos celulares, formulaciones de medios, métodos de extracción, fraccionamiento y enriquecimiento de proteínas nos permite diseñar el proceso de producción más óptimo para sus materiales de base.

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PREPARACIÓN DE ADN DE PLÁSMIDO A GRAN ESCALA

PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS A GRAN ESCALA

  • medios acondicionados clarificados de células de mamíferos, levaduras e insectos
  • sedimento celular de mamíferos
  • pasta celular de insectos
  • pasta bacteriana
  • pasta de levadura
  • transfección transitoria a células de mamíferos
  • infección de células de insectos con baculovirus de título alto
  • propagación de células de insectos o mamíferos de expresión estable
  • crecimiento de la línea celular de suspensión en frascos de agitación y biorreactores de onda
  • crecimiento de líneas celulares adherentes en frascos multifloor y fábricas celulares

OPCIONES DE LISIS CELULAR

  • la sonicación
  • la homogeneización
  • la solubilización de detergente
  • tratamiento de solución hipotónica
  • combinación de lo anterior

SCREEN REPLEGADO DE CUERPOS DE INCLUSIÓN

ENRIQUECIMIENTO DE PROTEÍNA OBJETIVO POR

  • precipitación con sulfato de amonio
  • centrifugación por gradiente de sacarosa
  • extracción de detergente diferencial
  • partición con Tritón X-114
  • tratamiento para preparaciones de membrana
  • aislamiento, lavado, solubilización y replegado de cuerpos de inclusión

CONCENTRACIÓN E INTERCAMBIO DE TAMPONES DE MEDIOS ACONDICIONADOS POR

  • centrifugación
  • filtración tangencial de flujo (FTF)

ANÁLISIS CUANTITATIVO DE LA EXPRESIÓN PROTEICA OBJETIVO


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Servicios

Purificación de Proteínas

Nuestras habilidades en la purificación de proteínas personalizada han sido producto del trabajo de muchos años con medicamentos de proteínas, objetivos farmacológicos, componentes del sistema biológico y reactivos bioquímicos. Todos los Servicios de purificación de proteínas comienzan con el análisis de las propiedades físico-químicas y biológicas de una proteína objetivo, lo que da como resultado el desarrollo de procedimientos adaptados para su extracción, purificación y caracterización. Nuestra estrategia de purificación tiene como objetivo lograr una preparación de proteína activa homogénea en dos o tres pasos de purificación. Este objetivo se alcanza mediante una selección y optimización exhaustivas del paso de captura, la incorporación de un paso de filtración en gel para eliminar agregados, productos de degradación y otros contaminantes, selección de condiciones de los tampones que estabilizan la actividad biológica y previenen la degradación del producto. Trabajamos rutinariamente con anticuerpos, antígenos, enzimas, factores de crecimiento, proteínas de unión al ADN, proteínas de membrana, proteínas sanguíneas y muchos más. Aunque la mayoría de las proteínas requieren un enfoque individual, estamos seguros de que podemos manejar muy bien su proteína. La purificaremos de manera rentable, la caracterizaremos de acuerdo con sus especificaciones y se la entregaremos en una forma activa y compatible con la aplicación.

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CARACTERÍSTICAS DE PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS PERSONALIZADAS

  • purificación de 
    • fusión y proteínas marcadas de fuentes recombinantes
    • proteínas nativas de fuentes naturales
    • anticuerpos de diferentes isotipos incluyendo el IgM
    • proteínas de membrana
  • las escalas de purificación de proteínas comunes varían de 0.001g a 5g
  • las proteínas se purifican de acuerdo con la pureza especificada por el cliente
  • métodos de purificación de proteínas de
    • protocolos suministrados por el cliente
    • protocolos publicados
    • protocolos mejorados a partir de los protocolos suministrados por el cliente o publicados
    • protocolos de novo adaptados a los requerimientos del cliente
  • se puede utilizar cualquier modo de purificación de proteínas
    • intercambio iónico
    • filtrado con gel
    • afinidad (amplio espectro)
    • interacción hidrofóbica 
  • replegado de los cuerpos de inclusión 
  • desarrollo de métodos de purificación de proteínas para su transferencia a una instalación de Buenas Prácticas de Manufactura (BPM)
  • las columnas dedicadas se utilizan en cada proyecto
  • la eficiencia es proporcionada por la automatización y precisión de los sistemas AKTA de Amersham BioSciences (actualmente GE)

ANÁLISIS DE PROTEÍNAS PURIFICADAS INTERMEDIAS Y FINALES

La SDS-PAGE y/o técnica dot/Western blot se utilizan rutinariamente para el análisis de fracciones. La pureza final de la proteína se determina por densitometría a partir de geles teñidos con Coomassie. Los productos finales se suministran con un certificado de análisis, informe de purificación y, si procede, un registro de lote

  • la SDS-PAGE y/o dot/Western se utiliza rutinariamente para el análisis de fracciones
  • la pureza final de la proteína se determina por densitometría a partir de geles teñidos con Coomassie
  • los productos finales se suministran con un certificado de análisis, informe de purificación y, si es necesario, un registro de lote

TODAS LAS PROTEÍNAS PURIFICADAS PERSONALIZADAS SON

  • suministradas con un certificado de análisis adaptado a las especificaciones del cliente (leer más Caracterización de proteínas)
  • proporcionadas a una concentración específica de proteínas
  • formuladas en un tampón que protege de la degradación de proteínas debido a la proteólisis, oxidación y el esfuerzo cortante
  • dispensadas en tamaños alícuotas especificados

LOS SERVICIOS AUXILIARES DE PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS INCLUYEN


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Servicios

Caracterización de Proteínas

La caracterización analítica asegura la identidad, pureza, integridad estructural y conformacional, así como la función de la proteína. Realizamos una serie de análisis rutinarios de proteínas en todas las etapas del proyecto. Si es necesario, podemos enviar sus muestras para métodos adicionales de caracterización. También ofrecemos servicios especializados de caracterización de proteínas para las proteínas purificadas.

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ANÁLISIS DE PRODUCTOS PROTEICOS BRUTOS, INTERMEDIOS Y FINALES

  • electroforesis (SDS-PAGE, native-PAGE, isoelectroenfoque IEF-PAGE, urea-PAGE)
  • técnicas western blot/dot blot
  • ensayo de actividad enzimática por absorción de luz o fluorescencia
  • ELISA (directo o sándwich): Desarrollo del ELISA
  • ensayo de proteínas (absorbancia de proteínas a 280 nm (A280), ácido bicinconínico (BCA) o equivalente)
  • isotipado de anticuerpos
  • medición de endotoxinas: Solicitud de cotización de ensayo de endotoxinas
  • ensayo de ADN contaminante
  • Espectro de absorción UV-Vis

PREPARACIÓN Y PRESENTACIÓN DE MUESTRAS DE PROTEÍNAS PARA

  • análisis de aminoácidos
  • Análisis del N-terminal
  • identificación y análisis por espectrometría de masas
  • determinación del coeficiente de extinción

CARACTERIZACIÓN DE PROTEÍNAS

  • cromatografía analítica de exclusión de tamaño (estimación del Peso Molecular nativo, análisis de agregación)
  • cromatografía analítica de intercambio iónico (oxidación)
  • análisis de pureza por densitometría
  • espectroscopia de absorción de luz UV-Vis
  • análisis de productos de oxidación, degradación y agregación
  • análisis de desglicosilación de proteínas
  • interacciones de unión por co-inmunoprecipitación (co-IP), espectroscopia o cromatografía

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Servicios

Ensayos Funcionales y Desarrollo del Ensayo

Ofrecemos nuestra experiencia en Ensayos Funcionales y Desarrollo del Ensayo para estudios mecanísticos detallados de una proteína diana, mediciones bioanalíticas y cribado de alto rendimiento. Dado que caracterizamos a fondo los materiales para los que se desarrolla un ensayo, nuestros ensayos han maximizado las ventanas de señal, la baja variabilidad y son económicos. Estos ensayos pueden tener diversas aplicaciones, como el análisis de las actividades enzimáticas, la unión de moléculas pequeñas a proteínas, las interacciones proteína-proteína y las interacciones ácido nucleico-proteína. Además, ofrecemos nuestros servicios para la externalización de sus ensayos o estudios mecanísticos.

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MODOS FUNCIONALES

  • proteína-proteína, proteína-ácido nucleico, proteína-molécula pequeña o interacciones de unión a péptidos
  • ensayos funcionales del receptor
  • actividad enzimática
  • ELISA directo, indirecto, sándwich y competitivo: Desarrollo del ELISA
  • inhibición

FORMATOS DE ENSAYO

  • Placa de 96 pozos
  • muestra única (para absorbancia UV/Vis)
  • Compatible con HTS (cribado de alto rendimiento)

MÉTODOS DE DETECCIÓN PREFERIDOS

  • intensidad de fluorescencia
  • polarización de fluorescencia
  • transferencia de energía de resonancia de Förster (FRET)
  • luminiscencia
  • absorción de luz

DIANAS DEL ENSAYO

  • enzimas
  • anticuerpos
  • receptores
  • inhibidores
  • péptidos
  • moléculas pequeñas

RESULTADOS DEL ENSAYO

  • caracterización del sitio de unión (Bmax y Jd)
  • determinación de parámetros cinéticos en estado estable de la enzima (Km y Vmax)
  • caracterización de inhibidores
  • inhibición de un solo punto para múltiples inhibidores a una concentración especificada
  • Determinación de IC50 y Ki
  • análisis de la cinética del inhibidor de unión estrecha
  • determinación de la concentración de proteínas, péptidos y moléculas pequeñas

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Servicios

Desarrollo del ELISA

El Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) es un ensayo ampliamente utilizado en diagnósticos, descubrimiento de fármacos, desarrollo clínico y otras industrias de las ciencia natural. Este es un ensayo sensible que detecta y cuantifica una molécula objetivo en fluidos o soluciones biológicas. El ELISA se puede realizar en varios formatos y plataformas. Aunque un anticuerpo de objetivo específico es el aspecto central de un ELISA, otros componentes son también fundamentales para el rendimiento del ensayo. Nuestra experiencia integrada y sin fisuras en la bioquímica de anticuerpos y antígenos, ensayos funcionales, producción de proteínas recombinantes, cultivo de células de hibridoma, purificación de anticuerpos, caracterización y conjugación nos permite ofrecer un ELISA totalmente optimizado y validado para su aplicación final prevista.

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TIPOS DE ELISA

  • directo
  • indirecto
  • sándwich
  • competencia
  • inhibición

OPCIONES DE DETECCIÓN DEL ELISA

  • absorbancia visible
  • fluorescencia
  • luminiscencia

EL DISEÑO DEL ELISA INCLUYE LA SELECCIÓN DE:

  • formato del ensayo
  • anticuerpo o par de anticuerpos
  • estándares
  • química de recubrimiento de placas
  • tampones de bloqueo y lavado
  • estrategia de detección
  • reactivos de detección

LA OPTIMIZACIÓN DEL ELISA IMPLICA LA PRUEBA DE VARIOS(AS):

  • concentraciones de anticuerpos, muestras y tampones
  • protocolos de recubrimiento
  • protocolos de detección
  • titulaciones de tablero de ajedrez

SE PRUEBAN LOS PARÁMETROS DE VALIDACIÓN DEL ELISA:

  • robustez / precisión / veracidad
  • incertidumbre
  • límite de cuantificación
  • linealidad por dilución
  • paralelismo
  • recuperación
  • selectividad
  • estabilidad de la muestra

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Servicios

Etiquetado y Conjugación de Proteínas

Las proteínas etiquetadas nos permiten estudiar las interacciones moleculares específicas con alta sensibilidad en los sistemas biológicos complejos. Estos son reactivos importantes en numerosas aplicaciones biológicas, como ensayos, purificaciones, conjuntos de proteínas, estudios de localización, citometría de flujo, imágenes clínicas y mucho más. La calidad de las proteínas etiquetadas es fundamental para obtener datos coherentes y fiables. Aunque los procedimientos de etiquetado parecen ser simples y sencillos, la mayoría de ellos aún deben ser ajustados para tener en cuenta la naturaleza de una proteína con el fin de lograr los resultados deseados. Los posibles problemas que pueden surgir durante los procedimientos de etiquetado incluyen pérdidas de proteínas debido a la precipitación, manipulación e inestabilidad de la muestra, relación de etiqueta a proteína incompatible, eliminación incompleta de una sonda de etiquetado no conjugada y caracterización deficiente de proteínas antes y después del etiquetado. Además, han surgido nuevas tecnologías para el etiquetado dirigido que requieren una integración de la expresión y purificación de proteínas en el proceso de etiquetado. Tenemos una amplia experiencia con diversas técnicas de etiquetado de proteínas y estamos seguros de que podemos proporcionarle reactivos etiquetados de alta calidad para sus aplicaciones posteriores.

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ETIQUETADO NO SELECTIVO DE PROTEÍNAS

  • biotinilación con relaciones de incorporación determinados por un ensayo basado en HABA (ácido 4´-hidroxiazobenceno-2-carboxílico)
  • conjugación de sonda fluorescente con relaciones de incorporación determinadas por fluorescencia 
  • otras fracciones químicas (por ejemplo: Sulfo-etiqueta, colorantes) con relaciones de incorporación determinadas por espectroscopia UV-Vis
  • conjugación enzimática con relaciones de incorporación determinadas por ensayos de actividad enzimática

ETIQUETADO ESPECÍFICO DEL SITIO

  • Etiquetado del C-terminal a través de la "Sortagging" (Transpeptidación mediada por sortasa)
  • Etiquetado del N-terminal a través de la "Sortagging" (Transpeptidación mediada por sortasa)
  • etiquetado en los sitios de glicosilación

ETIQUETADO DE QUÍMICA CLIC

  • proteínas y/o glicocadenas modificadas con grupo azido 
  • proteínas y/o glicocadenas modificadas con alquinos
  • etiquetado clic catalizado con cobre (I) 
  • etiquetado clic sin cobre
  • varias opciones comerciales de los socios clic, incluidas las etiquetas dobles
  • aplicaciones in situ
  • conjugación y detección de proteínas

INMOVILIZACIÓN DE BIOMOLÉCULAS SOBRE SOPORTE SÓLIDO

  • inmovilización específica del sitio en un chip de manera orientada 
  • conjugación proteica con resina cromatográfica

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Eliminación y Pruebas de Endotoxinas

La eliminación de endotoxinas de soluciones biológicas es fundamental para muchas aplicaciones in vivo y basadas en células, ya que interfiere con la respuesta biológica. Las endotoxinas son polisacáridos que se encuentran en la pared celular externa de las bacterias gramnegativas. Las bacterias liberan endotoxinas en el momento de la lisis. El efecto tóxico de las endotoxinas se desencadena por su interacción con receptores específicos en las células inmunes, lo que resulta en la liberación de altas concentraciones de citoquinas y otras moléculas de importancia inmunológica. Dado que la endotoxina adventicia está presente en el aire, el agua y el material de laboratorio y no se puede eliminar mediante una simple esterilización, es casi imposible generar soluciones sin endotoxinas sin un procedimiento de eliminación. Cada proyecto de Eliminación de endotoxinas requiere un paso de desarrollo de protocolo que tenga en cuenta las propiedades biofísicas de una molécula objetivo, la aplicación final de la muestra y la formulación deseada. Durante años hemos desarrollado con éxito protocolos de Eliminación de endotoxinas para cumplir con los estrictos requisitos de la presencia de endotoxinas. Estamos seguros de que podemos hacer que su proyecto de Eliminación de endotoxinas tenga éxito.

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ELIMINACIÓN PERSONALIZADA DE ENDOTOXINAS DE SOLUCIONES ACUOSAS DE:

  • proteínas
  • ADN 
  • péptidos
  • biomasa

LOS MÉTODOS SE BASAN EN:

  • la carga
  • la hidrofobicidad
  • la combinación de carga e hidrofobicidad
  • la afinidad de ligando
  • el tamaño

CARACTERÍSTICAS DEL SERVICIO:

  • las pérdidas de proteínas se minimizan mediante la selección de un método adecuado de eliminación de endotoxinas y su optimización
  • las escalas varían de mg a g de una molécula objetivo
  • las muestras libres de endotoxinas se esterilizan y se distribuyen en múltiples alícuotas para una mayor comodidad
  • se entrega en un tampón compatible con la aplicación
  • los plazos de entrega son de menos de 1 semana en la mayoría de los casos: Solicitud de cotización de ensayo de endotoxinas
  • ensayo a base de fluorescencia de Factor C recombinante (rFC) compatible con detergente
  • niveles de detección inferiores a 0,01EU/ml
  • El ensayo cinético del LAL (Lisado de amebocitos de Limulus) y otros ensayos de endotoxinas están disponibles

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Servicios

Desarrollo y Producción de Anticuerpos

En los últimos 30 años, los Anticuerpos se han convertido en reactivos muy importantes en la investigación, el diagnóstico y la medicina. Esta clase de moléculas se utiliza mucho ahora en numerosos campos de la investigación biomédica, como los inmunoensayos (Western blots, ELISA, etc.), la purificación de proteínas, la identificación de proteínas y los estudios de interacción proteína-proteína. Muchos conjuntos de diagnóstico comerciales tienen anticuerpos como sus componentes fundamentales. Actualmente, existen 75 Anticuerpos monoclonales o sus derivados aprobados por la FDA (Administración de Medicamentos y Alimentos) y muchos más se están probando en estudios clínicos. Cada proyecto de anticuerpos requiere un enfoque personalizado que recopile todos los datos sobre un antígeno y defina las propiedades del anticuerpo final. Tenemos una larga historia en el desarrollo y producción de anticuerpos para nuestros clientes. Planearemos su proyecto de Anticuerpos a fondo para lograr los resultados deseados.

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PURIFICACIÓN DE ANTICUERPOS DE FUENTES BIOLÓGICAS

  • todos los isotipos de anticuerpos de cualquier especie
  • eliminación de endotoxinas de soluciones de anticuerpos
  • conjugación de anticuerpos con tintes fluorescentes o enzimas
  • caracterización de anticuerpos por ELISA y otros ensayos

PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS RECOMBINANTES EN SISTEMAS DE EXPRESIÓN DE MAMÍFEROS POR TRANSFECCIÓN TRANSITORIA O ESTABLE


PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS MONOCLONALES A PARTIR DE LÍNEAS CELULARES DE HIBRIDOMA


PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS POLICLONALES

  • diseño de un antígeno con propiedades inmunogénicas
  • generación, producción y purificación de antígenos
  • análisis de sangrados para determinar la especificidad mediante ELISA y/o Western blot
  • purificación de anticuerpos del plasma sanguíneo

PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS MONOCATENARIOS (scFv) y FRAGMENTOS DE UNIÓN AL ANTÍGENO (Fab) EN E.COLI

  • diseño de un constructo de expresión
  • expresión en E.coli y su optimización
  • purificación de anticuerpos

GENERACIÓN DE FRAGMENTOS FAB Y (FAB)2 A PARTIR DE ANTICUERPOS DE LONGITUD COMPLETA

  • optimización de la reacción de digestión enzimática
  • eliminación de fragmentos de cadenas pesadas
  • Purificación de Fragmentos de unión al antígeno (Fab) y (Fab)2

VISUALIZACIÓN DE FAGOS PARA LA GENERACIÓN DE ANTICUERPOS MONOCLONALES

  • generación de una biblioteca de visualización de fagos anticuerpos a partir de pacientes infectados/enfermos o animales inmunizados con antígenos
  • visualización panorámica y cribado de fagos
  • análisis de secuencias
  • generación de scFv, fragmentos de unión al antígeno o inmunoglobulinas enteras en diversas expresiones

CARACTERIZACIÓN DE ANTICUERPOS PARA ESPECIFICIDAD Y SELECTIVIDAD


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